| 毛木耳漆酶基因的克隆、序列分析及其鉴定的研究 |
| 杨建明; 孟鑫; 徐鑫; 张磊; 李强; 咸漠 ; 潘迎捷
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| 2008
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| 发表期刊 | 微生物学通报
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| ISSN | ISSN 0253-2654
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| 卷号 | 35期号:11页码:1708-1714 |
| 摘要 | 本文利用 PCR 和 RACE 技术首次从毛木耳 AP4 菌株中获得编码漆酶基因的 cDNA 及其基因组全长序列, 基因组大小为 2514 bp。通过比较该漆酶基因的 cDNA 和基因组 DNA 的全长序列, 发现该基因包含 14 个外显子和 13 个内含子。 cDNA 序列的全长为 1972 bp, 其包含一个完整的 ORF, 长度为 1860 bp, 编码 619 氨基酸, 推测的分子量大小为 68 kD, 等电点 pI 为 5.15。在氨基酸序列的氨基末端存在一个信号肽序列, 同时该基因还包括含铜氧化酶的三个功能结构域KOG1263、SufI 和 pfam00394。氨基酸序列与 GenBank 中登录的真菌漆酶蛋白序列比对表明：该氨基酸序列与其它真菌漆酶蛋白序列有较高的同源性, 氨基酸序列相同性最高达 41%, 相似性为58%, 并且含有真菌漆酶的四个保守的 Cu-bind 结构域。将获得的漆酶基因 lac1 与毕赤酵母表达载体 pPIC9K 连接, 构建重组质粒 pYH3660, 将其转化到毕赤酵母中, 经甲醇诱导该基因在第 10天产酶高达 123 IU/L, 并通过 Native SDS-PAGE 电泳获得预期大小的漆酶蛋白条带。结构分析和功能验证均表明：本研究获得的基因 lac1 为漆酶基因。 |
| 关键词 | 毛木耳
漆酶基因
Race
结构域
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| 学科领域 | 生物基化学品
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| 收录类别 | CSCD
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| 语种 | 中文
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| 引用统计 |
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| 文献类型 | 期刊论文
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| 条目标识符 | http://ir.qibebt.ac.cn/handle/337004/434
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| 专题 | 生物基材料组群
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推荐引用方式
GB/T 7714 |
杨建明,孟鑫,徐鑫,等. 毛木耳漆酶基因的克隆、序列分析及其鉴定的研究[J]. 微生物学通报,2008,35(11):1708-1714.
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| APA |
杨建明.,孟鑫.,徐鑫.,张磊.,李强.,...&潘迎捷.(2008).毛木耳漆酶基因的克隆、序列分析及其鉴定的研究.微生物学通报,35(11),1708-1714.
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杨建明,et al."毛木耳漆酶基因的克隆、序列分析及其鉴定的研究".微生物学通报 35.11(2008):1708-1714.
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