生物传感技术团队（过去）知识库

To test and verify the application of landscape phage as a specific probe for detection, the phage clones (displaying the peptide ERNSVSPS) P1 and P5 (displaying the peptide ATRSANGM) which performed better specificity for f-PSA and t-PSA, respectively, and anti-PSA monoclonal antibody were used to establish “Phage-PSA-mAb” sandwich ELISA array. The specific phages were coated on the microwell plate as a captured probe to distinguish the PSA，and the anti-PSA mAb was added as a detection probe, then the HRP-IgG was used to develop color. After the optimization of the microwell plate, coating buffer pH, blocking, phage concentration, incubation conditions and mAb dilution, the sandwich ELISA array for f-PSA and t-PSA were respectively established. Under the optimal conditions, the absorbance at 492 nm was linear within 0.8~165 ng/mL for f-PSA and within 3.3~330 ng/mL for t-PSA. The limits of detection were 0.33 ng/mL for f-PSA and 1.6 ng/mL for t-PSA. The established ELISA method can be applicable to the detection of f-PSA and t-PSA in real serum, which is in good accordance with electrochemical immunoassay. Therefore, the phage monoclones screened from f8/8 landscape phage display library have potential application in developing novel biological probes.